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oct包埋前沿信息_眼科oct一般多少钱做一次(2024年12月实时热点)

内容来源：材料耗材资讯网所属栏目：教程更新日期：2024-12-01

oct包埋

冰冻切片冰晶和组织破碎的解决方法冰冻切片在科研和病理诊断中的应用越来越广泛，但高质量的免疫组化染色效果受多种因素影响。许多人在做冰冻切片时经常遇到冰晶和组织破碎的问题，下面是一些解决方法：快速冷冻保存：组织离体后应尽快进行冷冻保存，擦干表面血渍，避免PBS冲洗，包埋时尽量防止气泡产生。使用专用包埋模具：使用专用的OCT包埋模具，避免组织不规则周边有突出部分，影响切片组织的完整性。固定样品托：确保样品托牢固固定，避免切片时出现移动。切片技巧：切片时要先慢后快，先慢是为了减小刀片的切力，使组织片不容易卷曲，后快是为了使所切的组织片远离刀片边缘，使得贴片容易。多次切片：对于有特殊切面的样本，尽量一次性多切几张，每一次切片对组织都有损耗，反复冻融保存不当会影响后续组织形态。防冰晶方法：单纯OCT胶包埋法：将新鲜组织冰冻迅速置于包埋托上，再将组织的表面全部用进口OCT胶包后放入低温切片机内冷冻5分钟左右切片。高渗透压脱水法：将固定过的组织取材后置于10%~30%的梯度蔗糖溶液中，置4℃冰箱过夜，待组织块沉底后，取出，用OCT胶包埋切片。低温骤冷法：将组织块置入低温环境中，使组织骤然降温。本实验室采用的是液氨骤冷，即将新鲜取材的组织迅速置于液氨罐内10~30秒取出，OCT胶包埋后置于低温切片机内待其复温至-20℃左右即可切片。通过以上方法，可以有效解决冰冻切片中冰晶和组织破碎的问题，提高免疫组化染色效果。

动物组织冰冻切片全攻略𐟧Š𐟔ꊱ. 𐟔„ 脱水步骤：将新鲜组织置于20%的蔗糖溶液中，待其沉底后转入30%的蔗糖溶液进行脱水。对于较大的组织，可以再次使用30%的蔗糖溶液进行脱水，确保脱水彻底。 𐟧Š 固定与包埋：将组织固定在固定液中48小时。如果需要进行特殊染色，可以直接用液氮速冻组织，然后使用OCT包埋剂进行包埋。 𐟔ꠥˆ‡片准备：将脱水后的组织用滤纸吸干表面水分，然后在包埋盒中滴入一些包埋剂。将组织切面朝下放入包埋盒，用OCT包埋剂覆盖完全，常温浸润约5分钟。将包埋盒放在冰冻切片的速冻台上速冻，待OCT变白变硬后即可进行切片。如果暂时不切片，可以保存在-20℃。 ✂️ 切片操作：将包埋块固定在切片机上，先进行粗切（25）修切平整后，开始切片，厚度为5-12。将干净的载玻片平放在切出的组织片上方，将组织贴于载玻片上，切片后保存在-20℃或-80℃。

如何正确取材和保存动物样本以供邮寄动物组织样本的取材和保存对于后续的实验和检测至关重要。以下是详细的步骤和注意事项：动物组织样本的取材组织离体后应立即清洗并固定。常用的固定液有10%中性福尔马林或4%多聚甲醛，避免使用酒精。固定液的温度应保持在室温。固定用的器皿应根据样本体积选择，固定液的体积应是样本体积的10-15倍。避免使用V型底、细长或小管固定。大组织标本应切开固定，以免中间部分自溶腐败。冰冻切片标本必须新鲜，处理步骤为：组织离体后用OCT包埋，-80℃保存。送检过程中需有足够多的干冰或冰袋。特殊组织需要使用特定的固定液，以避免样本发生变化，影响后续检测。胃、肠道的内容物处理需特别注意：不能用挤的方式，以免破坏黏膜。可以用针打10%中性福尔马林或4%多聚甲醛到胃和盲肠里面去固定一会儿，半小时后切开用10%氯化钠溶液清洗，再固定。对于皮肤、肺等轻质组织，可以选择在固定液上放沾湿的棉花团压住，避免组织漂浮在固定液上导致固定不充分。或者往肺组织的主支气管中灌固定液冲洗整个肺部，使肺部充盈后再放入固定液中送检。动物组织样本的保存和邮寄寄送前需确保样本已固定好，并按样本保存要求执行。固定液固定的组织样本、组织蜡块、白片及其他非荧光染色玻片常温寄送。玻片在包装时需放入纸巾或气泡膜防震。 4℃保存的样本在寄送时选择冰袋运输，固定液切勿冷冻结冰。荧光染色玻片送检时置于载玻片盒中低温避光送检，可放入纸巾或气泡膜防震，外面包一层锡纸避光，放足够冰块或干冰低温送检。冰冻切片样本送检过程中必须有足够多干冰，选用保温泡沫箱进行包装。送检的标本应具有物种、标本类型、标本离体时间、固定时间、固定类型、组织部位等信息，信息必须与送检纸质信息一致并清晰，并确定组织是否固定完全。如果难以判断，请与病理实验室工作人员联系咨询。体积过小过薄的组织样本易丢失，不建议送检（如厚度＜1mm的样本）。取材中各器脏常规采集要求取材前需进行动物麻醉、放血，避免组织内部血液太多，固定不充分。动物死亡、组织离体后尽快（不可超过10分钟）固定或冻存，避免组织出现自溶。通过以上步骤和注意事项，可以确保动物组织样本的正确取材和保存，为后续的实验和检测提供可靠的保障。

冰冻切片全攻略：从新手到高手 𐟧Š 实验材料新鲜组织 H2O2 酒精丙酮 PBS DAPI工作液中性树胶 OCT 速冻架恒冷箱切片机烘箱荧光显微镜 𐟔ꠥ–材尽快采取新鲜材料，防止组织死后变化。 ❄️ 速冻将组织块平放在软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。如果组织块小，可以适量加入OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。当盒底部接触液氮时开始气化沸腾，此时保持小盒原位，不要浸入液氮中，大约10-20秒组织即迅速冰结成块。制成冻块后，置入恒冷箱切片机进行冰冻切片。如果需要保存，快速用铝箔或塑料薄膜封包，立即放入-80℃冰箱贮存备用。 𐟓Œ 固定在样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织置于其上，4℃冰箱预冷5-10分钟让OCT胶浸透组织。取下组织置于锡箔或玻片上，样品托速冻。将组织置于样品托上，再添一层OCT胶，以完全覆盖为宜，速冻架（PE）上30分钟。 𐟔ꠥˆ‡片使用恒温冰冻切片机，将其置于低温密闭室内，切片时不受外界温度和环境影响，可连续切薄片至5-10。切片时，低温室内温度以-15℃ ~ -20℃为宜，温度过低组织易破碎，抗卷板的位置及角度要适当，载玻片附贴组织切片，切勿上下移动。切好室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定5-10分钟，烘箱干燥20分钟。PBS洗5分钟㗳次。进行抗原热修复，微波热修复也可，室温自然冷却。可用3%H2O2孵育5-10分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。 𐟌ˆ 免疫荧光染色冰冻切片室温晾干15分钟，用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时。滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（可以均匀覆盖组织面，保证过程中不会使组织干涸）。将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。第二天先将湿盒放到37℃回温1小时，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5分钟㗳次。滴加DAPI工作液染核，室温10-20分钟（工作浓度0.1%染色15分钟）。回收DAPI，滴加5-10抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察拍照。做好的切片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。

如何科学保存实验动物样品？一文搞定！嘿，大家好！今天咱们来聊聊实验动物样品的保存和寄送问题。很多小伙伴在这方面可能有点摸不着头脑，别担心，我来帮你理清楚。动物组织样本的保存首先，咱们得知道，离体后的组织样本最好在20分钟内固定好，这样才能保证后续检测的准确性。送检的样本必须是固定好的，而且固定时间要超过两天。不同组织和不同的检测目的，固定的方法也不一样。病理检测样本组织样本离体后要立刻固定，常用的固定液有10%中性福尔马林或4%多聚甲醛（尽量不要用酒精固定），室温保存就行。固定的器皿要根据样本体积来选，组织固定液的体积应该是样本体积的10-15倍。避免用V型底、细长或小管的固定器皿。大组织标本要切开固定，防止中间部分自溶腐败。如果有特殊要求，可以根据实验要求选择其他处理方式。如果是冰冻切片标本，必须新鲜处理。步骤是：组织离体后用OCT包埋，-80℃保存。送检过程中要有足够的干冰或冰袋。特殊组织需要用特定的固定液，避免样本发生变化，影响后续检测。具体要求可以参考表格1。胃、肠道的内容物处理要注意：不能用挤的方式，会破坏黏膜。可以用针打10%中性福尔马林或4%多聚甲醛到胃和盲肠里固定一会儿，半小时后切开用10%氯化钠溶液清洗，再固定。对于皮肤、肺等比较轻、容易漂浮的组织：可以在固定液上放沾湿的棉花团压住，避免组织漂浮导致固定不充分。或者完整的肺组织离体后，往主支气管中灌固定液冲洗整个肺部，使肺部充盈，然后把充盈后的整肺放入固定液中送检。细胞样本贴壁细胞：细胞消化后离心，倒掉培养液保留细胞沉淀，用PBS洗一遍，离心倒掉液体保留细胞沉淀后加固定液（10%中性福尔马林或4%多聚甲醛）重悬，常温送检。悬浮细胞：离心，倒掉培养液保留细胞沉淀，用PBS洗一遍，离心倒掉液体保留细胞沉淀后加固定液（10%中性福尔马林或4%多聚甲醛）重悬，常温送检。希望这篇文章能帮到你们，实验顺利哦！如果有任何问题，欢迎留言讨论！𐟒쀀

病理实验样本保存与邮寄小贴士 𐟧갟šš 大家好，今天来聊聊一个让人头疼的问题：病理实验中样本的保存和邮寄。相信很多小伙伴都遇到过这样的情况，辛辛苦苦造好的动物模型，取材后因为保存不当，结果检测做不了，几个月的努力全都白费了。今天我就来给大家分享一些小技巧，希望能帮到大家，避免踩坑。组织样本的保存 𐟧ꊦ𘅦𔗥Ž立即固定：取材后，组织离体清洗干净，然后立即用10%中性福尔马林或4%多聚甲醛固定。室温保存即可。固定液的量要足够：固定用的器皿要根据样本体积来选择，组织固定液的体积应是样本体积的10-15倍。避免使用V型底、细长或小管固定，大组织标本要切开固定，以免中间部分自溶腐败。冰冻切片样本的保存 ❄️ 新鲜取样：冰冻切片标本必须新鲜，处理步骤是组织离体后用OCT包埋，然后放入-80℃保存。送检过程中要有足够多的干冰或冰袋。特殊组织的处理 𐟧ꊧ‰𙦮Š组织需要特定固定液：有些特殊组织需要用特定的固定液，避免样本发生变化，影响后续检测。具体要求可以参考相关图表。胃、肠道内容物的处理：胃和肠道的内容物处理时要特别注意，不能用挤的方式，会破坏黏膜。可以用针注射10%中性福尔马林或4%多聚甲醛到胃和盲肠里固定一会儿，半小时后切开用10%氯化钠溶液清洗，然后再固定。轻飘飘的组织：对于皮肤、肺等比较轻，容易漂浮在固定液上面的组织，可以在固定液上面放一个沾湿的棉花团压住，避免组织漂浮导致固定不充分。或者对于完整的肺组织，可以往主支气管中灌固定液冲洗整个肺部，使肺部充盈，然后把充盈后的整肺放入固定液中送检。石蜡切片和冰冻切片的运输 𐟚š 石蜡切片：4%多聚甲醛（福尔马林）固定，冰袋运输。冰冻切片：取样后直接-80℃保存，干冰运输。透射电镜样本的保存 𐟔슩€射电镜：2.5%戊二醛固定，冰袋运输。特殊样本：ROS（活性氧检测）需要新鲜样本。希望这些小贴士能帮到大家，避免在实验中遇到不必要的麻烦。下次我们再来聊聊透射电镜和扫描电镜的取材及保存注意事项。祝大家实验顺利！𐟒ꀀ

轻松搞定大小鼠脑组织切片，上篇指南 ### 一、操作流程 𐟚€ 实验准备首先，打开冰冻切片机的电源开关，启动样品头压缩机。然后，设置冰冻箱温度为22℃～-20℃，样品头温度为18℃～-21℃。确认手轮处于“锁住”状态，等待降温。材料与试剂脑组织长方体模具 48孔板铝箔纸解剖镊防卷板切片刀细毛笔 OCT包埋剂封口膜载玻片 PBS 二、脑组织处理 𐟧 模具制作准备一张适当大小的铝箔纸，折叠成3层。将铝箔纸沿着长方体模具的外周折叠，确保完全贴合并包裹住模具的五个面。固定好铝箔纸的形状后，标注A（前部）、P（后部）以及脑组织的编号。标记完成后，小心地将长方体模具取出，得到一个棱角分明、底面平整的空心铝箔纸模具。脑组织包埋在蔗糖溶液中沉淀后的脑组织取出后，用无尘擦拭纸吸除表面液体，晾置片刻以确保表面完全干燥。在成型的铝箔纸模具底部倒入少量OCT包埋剂，将脑组织腹侧向下平放入模具中，使大脑中缝平行于模具长边。用解剖镊轻轻压实脑组织表面，使其沉入底部，随后添加OCT包埋剂至液面高于脑组织2~3mm。三、脑组织切片 𐟔ꊥ†𐥆𛥈‡片机零件组装将实验所需的细毛笔、切片刀、防卷板等工具放入切片机冰冻箱中预冷。将包埋好的脑组织放入冰冻箱内的速冻区域，保持温度在-50℃，并让其快速冷冻约10分钟，直至OCT包埋剂完全凝固。未完待续...

冰冻切片全攻略：从零开始到荧光显微镜观察 𐟧Š 实验材料准备新鲜组织 H2O2 酒精丙酮 PBS DAPI工作液中性树胶 OCT 速冻架恒冷箱切片机烘箱荧光显微镜 𐟔ꠥ–材尽快获取新鲜组织，以防止死后变化。 ❄️ 速冻将组织块放在软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。如果组织块小，可以加OCT包埋剂浸没，然后放入盛有液氮的小杯内。当小盒底部接触液氮时，开始气化沸腾，保持原位约10-20秒，组织迅速冰结。制成冻块后，放入恒冷箱切片机进行冰冻切片。如果需要保存，用铝箔或塑料薄膜封包，立即放入-80℃冰箱。 𐟓Œ 固定在样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织放在上面，4℃冰箱预冷5-10分钟。取下组织，放在锡箔或玻片上，样品托速冻。将组织放在样品托上，再加一层OCT胶，覆盖完全，速冻30分钟。 𐟔ꠥˆ‡片使用恒温冰冻切片机，置于低温密闭室内，切片不受外界温度影响。切片时，低温室内温度保持在-15℃ ~ -20℃，温度过低组织易破碎。切片后，室温放置30分钟，入4℃丙酮固定5-10分钟，烘箱干燥20分钟。用PBS洗5分钟，重复3次。进行抗原热修复，微波热修复或室温自然冷却。用3%H2O2孵育5-10分钟，消除内源性过氧化物酶活性。 𐟌ˆ 免疫荧光染色冰冻切片室温晾干15分钟，用含10%正常山羊血清的PBS封闭1小时。滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，覆盖组织面。将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。第二天，将湿盒放到37℃回温1小时，回收一抗，切片放入小染缸PBS冲洗。滴加用PBS稀释好的二抗（避光），置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5分钟，重复3次。滴加DAPI工作液染核，室温10-20分钟（工作浓度0.1%染色15分钟）。回收DAPI，滴加5-10抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片。切片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。希望这份详细的冰冻切片指南能帮助你顺利完成实验！𐟔좜耀

肌肉组织冰冻切片全攻略，实验党必看！肌肉组织的冰冻切片主要用于保留组织的抗原性和形态结构，以便后续的切片和染色分析。以下是详细的操作步骤和注意事项：前期准备取材：选择中等受累的肌肉组织进行取材，避开肌电图的穿刺点。切取的肌肉组织大小一般为0.5cm㗰.5cm㗱cm左右。固定：将切取的肌肉组织迅速放入适当的固定液中，如丙酮或特定的冷冻固定液，以防止组织自溶和腐败。包埋步骤速冻：冷却异戊烷：将气泡较少的异戊烷倒入烧杯中，然后轻轻放入液氮中冷却，直至异戊烷完全冷却并产生白色结晶。组织速冻：使用长柄枪镊子夹住固定好的肌肉组织，迅速放入低温异戊烷中，并向左右迅速而轻柔地晃动，确保组织均匀冷冻。后续处理：在异戊烷中固定20～30秒后，移入-20℃冰箱中放置1小时，使组织周围的异戊烷挥发干净。然后，将冻结好的组织放入密封的塑料瓶中，置于-86℃以下的冰箱中保存。 OCT包埋材料准备：准备好OCT包埋剂（一种用于冰冻切片的组织包埋剂）。包埋操作：在冷冻切片机中，将少量OCT包埋剂滴加在样品托上，然后将速冻好的肌肉组织放置在OCT包埋剂上。使用镊子或冷冻切片机自带的工具轻轻按压，使OCT包埋剂完全包裹组织。凝固：将包埋好的组织放入冷冻切片机中，等待OCT包埋剂凝固。凝固后，组织就被固定在OCT包埋剂中，可以进行后续的切片操作。注意事项操作环境：所有操作均需在低温环境中进行，以防止组织融化和损坏。操作速度：速冻和包埋过程需要迅速进行，以减少冰晶的形成和对抗原性的破坏。组织保护：在包埋过程中要确保组织不被挤压或损伤，以免影响后续的切片和染色效果。设备要求：冰冻切片和包埋需要使用专门的冷冻切片机和包埋设备，以确保操作的准确性和可靠性。后续处理包埋好的肌肉组织可以存放在-86℃以下的冰箱中，待需要时进行切片和染色分析。切片后的组织可以进行苏木精-伊红染色、改良Gomorii染色、糖原过碘酸-Schiff（PAS）染色、油红O（ORO）染色以及免疫组化染色等多种染色方法，以观察组织的病理变化和抗原表达情况。以上信息基于现有的医学文献和实际操作经验进行整理，具体操作可能因实验室条件和设备而有所不同。在实际操作中，应严格遵循实验室的SOP文件和操作规程进行。

北京生命科技研究院取得可调节OCT包埋盒模具及包埋盒专利，实现不同尺寸OCT包埋盒的制作

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